大肠杆菌蛋白表达系统是目前应用最广泛,最具经济效益的蛋白表达系统。E. coli遗传背景清楚、细胞增殖快、表达量高、稳定性好和抗污染能力强等特点,适用于绝大多数多肽/蛋白的表达,尤其对小分子蛋白的生产具有极大的优势,表达形式分为可溶性或者包涵体的表达。百奥泰提供从密码子优化到重组蛋白表达/纯化的一站式服务以及内毒素去除等附加服务,以满足不同的定制需求。我们拥有丰富的E. coli 蛋白表达/纯化等经验,拥有多种E. coli细胞株和表达载体,可为客户提供优质的原核蛋白表达服务。








大肠杆菌表达系统种类选择



* T7大肠杆菌表达系统
  以T7启动子、T7RNA聚合酶等T7噬箘体转录体系的元件为核心构建的表达系统。T7 RNA聚合酶一种高活性的RNA聚合酶,mRNA的合成速度比大肠杆菌内的RNA聚合酶快5倍,并某些不能被大肠杆菌RNA聚合酶转录的序列也可以转录,所以T7 RNA聚合酶和T7噬箘体启动子的存在的情况下,大肠杆菌本身的转录竞争不过T7噬箘体转录体系,最终受T7噬箘体启动子控制基因的转录。
* Lac和Tac大肠杆菌表达系统
  它是以大肠杆菌lac操纵子调控机理为基础设计、构建的大肠杆菌表达系统,具有多顺反子结构,结构排列为:
  启动子(lacP)- 操纵基因(lacO) – 结构基因(lacZ-lacY-lacA)
  原理:在无诱导物的情况下,负调节因子lacI基因产物形成四聚体阻遏蛋白与启动子下游的操纵基因紧密结合,阻止转录的起始。加入诱导剂后,IPTG与lacI基因产物结合,使操纵基因解离出来,lac操纵子的转录因此被激活。用tac启动子构建的表达系统称为Tac表达系统。

* PL和PR大肠杆菌表达系统
  以启动子PL、PR为核心构建的表达系统。PL和PR表达系统具有很强的启动转录能力,诱导时不需要加入化学诱导剂,成本低廉,但在热刺激过程中,大肠杆菌中的一些蛋白水解酶会被激活,降解所表达的外源蛋白;其次是在大规模发酵培养菌体时,通过热平衡交换方式提高温度,需要较长的时间,这会降低诱导效果,从而对重组蛋白的表达量有影响。
  此外还有其他表达系统,如pH调控型、营养调控型、糖原调控型等。



大肠杆菌表达系统比较





大肠杆菌与其他表达系统比较